【摘要】
二氧化碳培养箱提供了细胞生长环境, 为了正确使用, 根据它的结构和性能要求, 介绍
培养箱正确使用方法、常见故障的预防和处理。
【关键词】 二氧化碳; 设备和供应; 维修
多数细胞培养时需 37 ℃、5 %CO2 张力和饱和湿度的生长条件,
CO2培养箱提供了细胞生长环境。 目前G内生物研究室多数使用的是热导型
培养箱, 每台 4.5 万～ 5 .5 万元, 使用寿命 10 年。 从中南地区和我校报废维修资料看, 平均使用寿命是 6.5 年, 其主要原因是传感器损坏。
CO2培养箱价格昂贵,我们期望它按期或过期服役, 为正确使用, 根据它的结构和性能要求, 现介绍
培养箱的正确使用方法、常见故障的预防和处理。
1.温度传感器保护:培养箱温度由温度传感器控制, 它的正常运行需要 25 ℃室温条件。 常规使用时, 箱内放 1 ～ 2 支水银温度计作为温度对照。 温度传感器的正确运行, 使设定温度数、箱面显示数和箱内温度三者一致。 当室温高于 30 ℃时, 温度传感器调节功能失灵, 出现箱面显示温度高于设定数, 箱内温度又高于箱面温度, 并常伴随警告声。 此现象发生在白天,降低室温, 培养箱温度恢复正常运行。 若发生在晚上, 持续高温使细胞死亡。 为避免这一现象发生, 夏季使用培养箱时, 无菌室应保持 25 ℃左右室温。
2.气体传感器保护:箱内气压由 CO2 气体传感器控制。
CO 2 传感器正常反馈要求进气压为 0 .06 兆帕。 开门后, 箱内气体丢失, CO2 压力下降。 关门后, CO 2 传感器在低压刺激下有节奏地开闭, 向箱内慢慢充气, 当进气压达 0 .06 兆帕时, 自动停止调节。 换气瓶时, 部分实验者针对进气压, 采用加大进气压的快速充气法, 使用 0.1 兆帕甚** 0 .2 兆铂压力, 无形中损伤了 CO2 传感器。 开始这种损伤效应不能显示, 实验者不能察觉, 反复错误操作, CO 2 传感器损伤累积**终致命损坏, 使气压调节失灵。 当实验者发现培养基颜色变化异常、细胞生长缓慢时, 已无法挽救损坏。 1 个气体传感器需 1 .6 万元, 更换 1个也不易。 因此, CO2 传感器寿命与 CO 2 进气压大小有关, 只要做好进气压调节, 就能保护 CO2 传感器性能。 为做好进气压调节, 现将气压调节归纳为 4 句话 17 个字:反时针松捍, 接气瓶, 顺时针减压, 进气压 0.06 。 安民告示, 张贴箱门, 使每个实验者都会操作。 为防止漏气, 在气瓶出口处填胶皮, 气压表接头处缠封口带, 气瓶与气压表连接后, 肥皂水试验, 接口无气泡出现为连接合格。
3.CO 2 零点飘移监控:培养箱使用过程中, CO2 气压零点会发生自然飘移现象, 这种现象不能在箱面气体显示框中表现出来, 实验者也不易觉察到飘移结果细胞培养液颜色变化异常、细胞生长缓慢甚**死亡。 CO 2 气压零点是否飘移, 可通过CO 2 气体测试仪, 取箱内气体检查确定。 如我们测试了 6 台
细胞培养箱, 它们的显示值都为 5 %, 测试结果为 2 台箱内外气压值一致, 其余 4 台中箱内气压值**高 18 %, **低 0 .5%, 这些异常气压值培养箱影响了细胞实验结果。 因此, 实验室应建立CO 2 气压零点测试制度, 通常每 3 个月进行 1 次, 以保证 CO2气压实际使用值的正确。
4.培养箱饱和湿度监控 :
CO2培养箱使用过程中, 要求在箱内托盘中放一定量的灭菌水(3/ 2 **全盘), 使箱内为饱和湿度环境, 这是针对开放培养细胞要求设计的。 因为饱和湿度环境可以避免培养液中 CO2 逃逸, 培养液中 pH 值稳定 , 有利于细胞生长。 实际使用过程中, 实验者常忘记补加水, 使培养细胞处于低湿度甚**干热环境中, 培养液 CO2 气体易挥发, 液体pH 值升高, 影响细胞生长。 为避免此问题发生, 我们采用箱面大字警告和值日生负责制相结合的方法, 能较好地落实这一措施。 此外, 针对箱内湿热环境易滋生细菌等问题, 我们采用在 1 000ml 水中加 2ml 新洁尔灭液, 定期用酒精和紫外线消毒箱内空气, 培养物酒精擦拭入箱内, 以减少箱内微生物滋生速度。 实验多时, 箱内分区存放, 培养物用筐或瓷盘存放, 这样存取快速, 缩短开门时间 , 减少箱内气体和湿度变化, 节省气体,稳定了细胞生长环境。
综上所述, 在
二氧化碳培养箱使用过程中, 只要做好室温、湿度和 CO2 气压零点测试纠正工作, 就能保证
二氧化碳培养箱正常运行, 使它真正成为培养细胞舒适的摇蓝。
